Каковы Плазмиды?
В пределах многих различных бактерий малые круглые части ДНК могут быть найдены в цитоплазме. Эти круги ДНК известны как плазмиды, и они являются отдельными от хромосомной ДНК, или ДНК, которая несет гены для клеток бактерий. Несколько копий плазмид часто присутствуют в любой момент в бактериальной клетке. Плазмиды играют очень важную роль в генной инженерии, особенно в генной имитации.
Когда гены имитируются, процесс обычно, имеет место в пределах бактерий. Чтобы получить ген, который должен имитироваться в бактерии, вектор необходим. Плазмида - то, что используется в качестве вектора, поскольку это может пройти легко от одной клетки до другого.
есть много шагов, включаемых в гене, имитирующем прежде, чем вставлять плазмиду в клетку - хозяина. Во-первых, ген, который должен быть скопирован, должен быть изолирован, как должен плазмиды, которые должны использоваться в качестве векторов. Как только это сделано, ген должен быть вставлен в ДНК плазмиды. Плазмида тогда вставлена в бактериальную клетку - хозяина для снятия реплики.
Чтобы изолировать плазмиды от бактериальных клеток, клетки нужно первоначально обработать с ферментами, чтобы сломать клеточные стенки бактерий. Большая хромосомная ДНК - отделенный от меньших плазмид, используя центрифугу. Изолированная ДНК плазмиды теперь готова вставлять ген в это.
Плазмиды составлены из двухниточного круга ДНК. Чтобы вставлять желаемый ген, ДНК плазмиды сокращена с ферментами ограничения. Эти ферменты только сокращают ДНК в очень определенных последовательностях нуклеотида. Как только ДНК плазмиды была сокращена, последовательности компоновщика добавлены к свободным концам, которые коррелируют к концам гена, который будет вставлен. Это гарантирует, что ген удовлетворяет точно в плазмиду.
Как только ген был вставлен в плазмиду, это теперь готово быть вставленным в живущую бактерию. Бактерии копируют свои плазмиды так, чтобы единственная клетка могла содержать много копий. Может быть до 200 копий единственной плазмиды в пределах одной бактерии. Если плазмида введена во многие бактериальные клетки, много копий гена могут быть произведены относительно быстро, особенно поскольку клетки бактерий копируют о каждых 20 минутах.
Это - процесс, который используется, чтобы создать человеческий инсулин. Генное кодирование для инсулина было изолировано и вставлено в плазмиду. Все плазмиды, содержащие ген инсулина, были тогда введены в бактерию, где они копировались. Бактерии тогда продолжали копировать себя, так, чтобы много миллионов клеток, содержащих ген инсулина, могли быть созданы в очень короткий промежуток времени. Этот имитируемый ген теперь предоставляет надежному источнику для человеческого инсулина.